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2019年底出現(xiàn)了一種新型的嚴(yán)重呼吸道疾病。 根據(jù)該病的病因這種新型冠狀病毒被命名為嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2型 (SARS-CoV-2; formerly 2019-nCoV) (Lake 2020; Gorbalenya et al. 2020)。
SARS-CoV-2與2002年和2003年描述的嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒 (severe acute respiratory syndrome coronavirus ; SARS-CoV) 同源性為79% (Lu et al. 2020; Zhou et al. 2020)。這兩種病毒都屬于冠狀病毒科,是一類出現(xiàn)在多種物種中的包膜、線性單股正鏈RNA病毒。大多數(shù)冠狀病毒只會(huì)造成輕微的呼吸性傳染病,只有中東呼吸綜合征冠狀病毒可引起嚴(yán)重的致死率。
SARS-CoV和SARS-CoV-2的轉(zhuǎn)移膜刺突糖蛋白 (transmembrane spike (S) glycoprotein) 可連接宿主細(xì)胞中的hACE-2受體,從而進(jìn)入宿主細(xì)胞 (Tortorici and Veesler, 2019; Zhou et al. 2020)。
刺突糖蛋白 (S Glycoprotein) 包含兩個(gè)功能亞基和一個(gè)介導(dǎo)連接宿主細(xì)胞的S1亞基。S蛋白具有非常強(qiáng)的免疫原性,當(dāng)它介導(dǎo)連接宿主細(xì)胞受體時(shí),中和抗體通常是受體連接區(qū)域 (receptor binding domain; RBD) 的目標(biāo) (Amanat et al. 2020)?;蛐蛄酗@示S基因編碼受體連接的刺突蛋白與其它CoV 的刺突蛋白有很大的不同。除了一個(gè)核苷酸與原始的蝙蝠病毒RaTG13相似度為93.1%以外,其它核苷酸序列與已知的SARS冠狀病毒的核苷酸相似度少于 75% (Zhou et al. 2020)。
與SARS-CoV序列相比較SARS-CoV-2中S基因的蛋白序列在N端結(jié)構(gòu)域中有3小段的插入,而且在受體連接區(qū)域中多數(shù)重要?dú)埢灿兴煌?(Zhou et al. 2020)。這種較高的分歧部分對(duì)于血清學(xué)檢測(cè)是一個(gè)很好的標(biāo)靶,旨在抗體應(yīng)答中區(qū)分兩種SARS病毒,以及冠狀病毒引發(fā)的普通感冒。
核衣殼蛋白 (nucleocapsid protein; N) 與基因組RNA結(jié)合形成復(fù)合物,可與病毒膜蛋白進(jìn)行相互反應(yīng),似乎扮演著在病毒轉(zhuǎn)錄和聚集中提高效果的重 要角色 (McBride et al. 2014)。 較早的SARS-CoV文 獻(xiàn)中已提及N蛋白和S蛋白一樣都是一種高度免疫原性蛋白 (Qiu et al. 2005)。
典型的免疫反應(yīng)IgM抗體通常是第一道防線。血清轉(zhuǎn)換到IgG發(fā)生在疾病的中后期,這些高親和力的IgG抗體負(fù)責(zé)長(zhǎng)期免疫和免疫記憶 (Li et al. 2020; Racine et al. 2009)。
在疾病發(fā)生過程中由于抗體出現(xiàn)的較晚,人們更傾向于用分子學(xué)方法檢測(cè)新冠病毒2型。由于分子檢測(cè)受靈敏度的限制,在患者有癥狀但PCR檢測(cè)假陰性的情況下,血清學(xué)可以增加確診的可能性 (Farnsworth and Anderson 2020; Xu et al. 2020)。 此外,血清學(xué)檢測(cè)在進(jìn)行大規(guī)模篩查和檢測(cè)潛在免疫中起著重要的作用,這樣可以確認(rèn)康復(fù)的個(gè)體是否可以捐獻(xiàn)血清,并且可以幫助確認(rèn)中和抗體在免疫應(yīng)答方面的研究 (Amanat et al. 2020; Farnsworth and Anderson 2020; Okba et al. 2020)。
研發(fā)高靈敏感度的血清檢測(cè)試劑的先決條件之一是要擁有高質(zhì)的原材料,這樣才能準(zhǔn)確的從病患者中區(qū)分健康個(gè)體。其中核心原材料-抗原能有目標(biāo)的捕獲患者的抗體。DIARECT新研發(fā)的SARSCoV-2核衣殼蛋白N和刺突糖蛋白S適用于不同的血清學(xué)檢測(cè)方法。DIARECT生產(chǎn)的抗原與患者血清有較高的反應(yīng),而與樣本相比較有著非常低的背景 (圖 2)。
DIARECT生產(chǎn)的SARS-CoV-2抗原表達(dá)于桿狀病 毒昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)。
產(chǎn)品訂購信息:
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 |
46000 | SARS-CoV-2 Nucleocapsid (N) Protein | 0.1mg |
46001 | 1mg | |
46100 | SARS-CoV-2 Spike (S) Glycoprotein RBD | 0.1mg |
46101 | 1mg |